关于PCR仪您了解多少?
浏览次数:1180发布日期:2022-03-14
PCR仪已成为一种潮流。反应时间从90分钟缩短到30分钟,是受欢迎的,毕竟谁也不想在预约时排队等太久。温度循环是所有PCR的基础。变温速率将决定PCR运行的整体速度。毫无疑问,变温越快,PCR运行也越快。宣传资料往往也会首先展示zui高变温速率以暗示运行速度更快。因此,在拿到参数表时,我们先会留意变温速率,也就是升降温速率。当然,样品的变温速率可没有模块那么高。这就好比在炉子上烧水,炉子很快就达到100℃以上,但水可能只有50℃。模块的热量传递到样品还需要一定的滞后时间。因此,只根据模块温度编程而不考虑样品体积的变温速率并不能算准确。这个参数能反应仪器根据体积来控制样品达到设置温度、遵循预设的实验方案运行的真实能力,更有效地评估真实性能。
PCR仪通常由热盖部件、热循环部件、传动部件、控制部件和电源部件等部分组成。在普通PCR仪设计基础上增加荧光信号激发和采集系统和计算机分析处理系统,形成了具有荧光定量PCR功能的仪器。其PCR扩增原理和普通PCR扩增原理相同,在PCR扩增时加入的引物是利用同位素、荧光素等进行标记,使用引物和荧光探针同时与模板特异性结合扩增。扩增的结果通过荧光信号采集系统实时采集信号连接输送到计算机分析处理系统,得出量化的实时结果输出。
有单通道,双通道和多通道之分。当只用一种荧光探针标记的时候,选用单通道;有多种荧光标记的时候使用多通道。单通道也可以检测多荧光的标记和目的基因表达产物,因为一次只能检测一种目的基因的扩增量,需多次扩增才能检测完不同的目的基因片段的量。多通道利于做多重PCR,实现一次检测多种目的基因的功能。